标题: ZEN DMT Phosphoramidite
一、化学试剂的基本信息
保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融
英文名称:ZEN DMT Amidite,ZEN DMT Phosphoramidite
中文名称:ZEN 基因沉默 DMT 亚磷酰胺
分子式:C50H55N6O7P
分子量:882.39
规格标准:该试剂的纯度通常达到95%以上,规格包括1mg、5mg、10mg等,也可按需包装。
生产商信息:陕西新研博美生物科技有限公司
展开剩余75%二、基本定义
ZEN DMT Amidite是一种专为寡核苷酸固相合成设计的亚磷酰胺单体。
结构组成
ZEN内部淬灭基团:位于寡核苷酸链内部的非荧光暗淬灭单元,提供双重淬灭效果。
DMT保护基:二甲氧基三苯基(DMT)是传统的5′端保护基,保证合成过程的选择性。
Amidite活性中心:亚磷酰胺基团(phosphoramidite)是DNA合成的活性单体,参与磷酸二酯键的形成。
刚性双环体系:核心结构为刚性双环骨架,产生空间位阻,提高核酸酶抗性。
技术原理
ZEN DMT Amidite 通过 双重淬灭技术 实现高灵敏度的荧光探针设计。
传统探针仅在3′端使用淬灭剂,而ZEN DMT Amidite 在内部嵌入ZEN淬灭基团,使报告染料在探针完整时被两侧淬灭,背景荧光极低;PCR 扩增时,Taq酶切除探针,内部ZEN基团因距离增大而失效,释放强烈荧光信号。
此外,ZEN基团的空间位阻还能显著提升寡核苷酸对核酸酶的抵抗力,延长半衰期。
三、寡核苷酸固相合成步骤
装柱与脱保护:在合成柱上加载起始核苷酸,使用 DMT 去保护剂去除 5′ 端 DMT 保护基。
偶联 ZEN DMT Amidite:将 ZEN DMT Amidite 与活化剂(如 DCI)混合,加入合成循环,偶联时间约 15 min,以确保高效耦合。
氧化:使用碘溶液对磷酸二酯键进行氧化,形成稳定的磷酸酯。
封端:用乙酸酐或其他封端试剂结束链的延伸,防止未反应位点继续延伸。
去保护与纯化:合成完成后,用氨水或特定试剂去除剩余的 DMT 保护基和 2-氰乙基基团;随后通过 HPLC 或 PAGE 进行纯化,并用质谱确认分子量。
储存:纯化后产品需在-20 ℃、避光、干燥条件下保存,以维持活性。
四、新研博美目录列表:
UDP-6-N3-Galactose
UDP-b-L-arabinopyranose disodium salt
FMOC-L-SER(BETA-D-GLCAC4)-OH
Glibenclamide,格列本脲
Fluocinolone acetonide,醋酸氟轻松
Gly3-VC-PAB-MMAE
SPDP-Val-Cit-PAB-PNP
二苯并环辛炔-油酸,Oleic-DBCO
t-Boc-N-Amido-PEG4-azide
MC-Val-Cit-PAB-MMAE,VcMMAE
1,3,5-Tri-O-acetyl-2-deoxy-D-erythro-pentofuranose
温馨提示:
试剂仅用于科研实验,不可用于人体~~~~~编辑作者:陕西新研博美木南
发布于:陕西省